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細(xì)菌回復(fù)突變(Ames)試驗

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項目詳情
  一,定義
 
  細(xì)菌回復(fù)突變(Ames)試驗用于檢測DNA損傷引起的基因突變,通過檢測受試物在測試菌株某些特殊構(gòu)建的突變體上引起突變的能力,即造成菌株從組氨酸/色氨酸依賴型向原養(yǎng)型突變,判斷受試物是否為致突變劑。
 
  試驗需在加和不加s9代謝活化系統(tǒng)條件下同時進(jìn)行。在培養(yǎng)細(xì)菌的瓊脂培養(yǎng)基中加入痕量的組氨酸或色氨酸,允許細(xì)菌前幾個小時生長,表現(xiàn)為背景菌苔。當(dāng)加入的組氨酸/色氨酸用盡后,只有發(fā)生了突變的細(xì)菌才可以繼續(xù)生長成為肉眼可見的回復(fù)突變菌落。
 
  二,不同類型的Ames試驗
細(xì)菌回復(fù)突變(Ames)試驗
 
  人用藥物注冊技術(shù)要求國際協(xié)調(diào)會議ICH推薦的標(biāo)準(zhǔn)遺傳毒性試驗組合:
 
  組合一
 
  1.細(xì)菌回復(fù)突變試驗;
 
  2.體外染色體畸變試驗、體外微核試驗或體外小鼠淋巴瘤tk試驗,任選一個;
 
  3.體內(nèi)微核試驗、體內(nèi)骨髓細(xì)胞染色體畸變試驗;動物給藥后取外周血淋巴細(xì)胞做細(xì)胞遺傳學(xué)分析也可接受,但不常用。
 
  組合二
 
  1.細(xì)菌回復(fù)突變試驗;
 
  2.用兩種不同組織做體內(nèi)遺傳毒性評估,包含體內(nèi)微核試驗和另一個體內(nèi)試驗。第二個體內(nèi)試驗通常選擇評估動物肝臟DNA鏈斷裂;
 
  3.細(xì)菌回復(fù)突變試驗是與致癌物檢測最相關(guān)的體外試驗。

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